Фізичні вправи – новий підхід до корекції мікробіома

Мікробіом людини — важлива складова здоров’я

Мікробіом кишечника людини являє собою складну екосистему, що складається з 39 трильйонів мікроорганізмів, і включає в себе не тільки бактерії, але і археи, гриби і віруси. (1) Зазначені мікроорганізми еволюціонували протягом тисяч років у симбіозі з організмом господаря. Кишкова мікрофлора відіграє важливу роль у травленні, імунних реакціях, виконує різноманітні метаболічні функції. Так, бактерії продукують коротколанцюгові жирні кислоти, які використовуються в якості поживної речовини не тільки колоноцитами, але і клітинами мікроглії мозку. Обмін холестерину і гормонів в організмі також здійснюється за участю кишкового мікробіома. (2)

З розвитком в кінці ХХ століття методів, що дозволяють оцінити склад і функції мікроорганізмів, а саме секвенування генома, з’явилася можливість вивчити різноманітність мікробних спільнот. Для якісної і кількісної оцінки бактеріального різноманітності в зразках широко застосовується секвенування 16S рибосомальною РНК мікроорганізмів, все більш доступними стають методи метагеномного аналізу, що дозволяють провести оцінку метаболізму і функцій того чи іншого виду бактерій. (3)

Найбільша кількість бактерій знаходиться в товстій кишці, серед яких в нормі переважають два типи, Bacteroidetes і Firmicutes (∼90%). Тип Firmicutes складається з більш ніж 250 родів бактерій, серед яких Lactobacillus і Clostridium, в той час як тип Bacteroidetes включає 20 пологів, з переважанням Bacteroides. Такі типи як Actinobacteria, Proteobacteria і Verrucomicrobia виявляються в складі нормальної мікрофлори, але в набагато менших кількостях. (1,4) Крім того, серед здорової мікробіоти товстої кишки можуть зустрічатися метанопродуцирующие археи, які, на відміну від інших живих організмів, які не містять пептидоглікан в клітинній стінці та мають особливі рибосоми і рибосомные РНК, а також еукаріоти (дріжджі) і віруси.

Поняття «норми» щодо кишкового мікробіома щодо, його склад може змінювати безліч різних факторів, що впливають на кишечник та організм людини в цілому. В даний час важливим для підтримки рівноваги між непатогенними і умовно-патогенними бактеріями вважається відношення чисельності Bacteroidetes до Firmicutes (так званий градієнт Firmicutes/Bacteroidetes). (5)

Заселення кишечнику мікроорганізмами починається з народження, і склад мікробіома визначається значною мірою способом розродження. В подальшому мікрофлора кишечника змінюється в залежності від харчових звичок, адаптуючись до нових продуктів в раціоні людини. (6, 7) Вакцинація, різні захворювання, прийом лікарських препаратів, куріння та інші чинники також впливають на композицію кишкового мікробіома і його метаболізм. (8, 9). У той же час має місце двостороння взаємодія між мікро — і макроорганизмом. Очевидною демонстрацією цього є важлива роль кишкової мікробіоти у формуванні гіпоталамо-гіпофізарно-надниркової осі, яка бере участь у регуляції імуномодуляції, обміну ліпідів, енергетичного балансу та електрофізіологічної активності ентеральної нервової системи. (11)

Вплив фізичних вправ на зміну кишкового мікробіома

Регулярні фізичні вправи рекомендовані Всесвітньою організацією охорони здоров’я для зміцнення здоров’я і зниження ризику розвитку багатьох захворювань, у тому числі психічних, а також для збільшення тривалості життя. (12) Ці рекомендації засновані на даних багатьох досліджень, що демонструють різноманітність патогенетичних шляхів, за допомогою яких поліпшується здоров’я на тлі фізичного навантаження. (13) З появою можливості вивчення мікробіома кишечника, вплив на його таксономічний склад і метаболізм за допомогою вправ служить предметом наукового інтересу.

Вивчення мікробного складу тварин при фізичних вправах демонструє суперечливі результати. Наприклад, у деяких дослідженнях виявлено збільшення градієнта Firmicutes/Bacteroidetes, в той час як інші свідчать про його зниження або відсутність змін. (Таблиця 1)

Ймовірно, це пов’язано з відсутністю стандартизації виду фізичних вправ, породи та віку тварин, їх дієти.

Таблиця 1. Вплив фізичних вправ на кишковий мікробіом тварин

Mailing et al продемонстрували, що різний вид фізичного навантаження — довільний біг мишей в колесі і по біговій доріжці, змінює мікрофлору кишечника різною мірою. (27) В експерименті Mika et al великих змін у складі кишкового мікробіома при однакових фізичних вправах вдалося досягти молодим тваринам, ефект був менш значущим з збільшенням віку. (26) Іншою групою вчених була підтверджена важлива роль дієти в формуванні мікробіома. Так, при однаковому фізичному навантаженні підвищення різноманітності складу мікрофлори відзначалося лише у мишей, що отримували корм із великим вмістом жиру. (17)

Вчені відзначають, що фізична активність може впливати не тільки на склад, але і метаболічну активність кишкового мікробіома. В експериментах на тваринах Matsumoto et al. виявлено збільшення продукції бактеріями бутирату на тлі фізичних вправ протягом 5 тижнів. Бутират являє собою короткоцепочечную жирну кислоту (КЖК), яка виробляється мікрофлорою кишечника за допомогою ферментації харчових волокон. Будучи важливим поживним субстратом для колоноцитов, дана КЖК сприяє прискоренню проліферації епітелію товстої кишки, підтримання цілісності кишкового бар’єру, бере участь в регуляції імунітету і експресії генів. (15)

Результати експериментів з участю тварин не дозволяють провести повну аналогію зі зміною микробима людей при фізичному навантаженні зважаючи відмінностей у таксономічний склад та метаболізмі.

Доказ впливу фізичних вправ на склад кишкового мікробіома людини були спочатку отримані з так званих поперечних досліджень, в яких дані збираються лише один раз і інші фактори, за винятком шуканого, приймаються за константу. (Таблиця 2)

Таблиця 2. Поперечні дослідження за участю людей

Фізичне навантаження мала кореляцію з зміною ставлення Firmicutes/ Bacteroidetes, збільшенням таксономічного різноманіття фекальної мікробіоти

Clarke et al. виявили, що мікробіом гравців у регбі має більшу різноманітність, в порівнянні з людьми, що не займаються спортом. При цьому чисельність видів Bacteroides та Lactobacillus у спортсменів була нижче. (28) У дослідженні Bressa et al. у жінок, які виконують фізичні вправи принаймні 3 рази в тиждень, відмічено підвищення рівня Faecalibacterium prausnitzii, Roseburia hominis, Akkermansia muciniphila. F. prausnitzii і R. hominis відомі як продуценти бутирату, в той час як A. muciniphila має відношення до зниження маси тіла і поліпшення метаболічних показників.(31)

Все більше робіт присвячено впливу фітнесу на склад і метаболізм кишкового мікробіома. Багато з них підтверджують виявлену на моделі тварин тенденцію до розширення мікробного різноманітності і збільшення продукції КЖК. (27,33) Обмеженням зазначених досліджень слугує їх дизайн (перехресні поперечні дослідження), відсутність обліку дієти і багатьох інших факторів, також вносять внесок в зміна мікрофлори кишечника.

Зазначені недоліки покликані виправити так звані лонгитудинальные (протяжні) дослідження, що дозволяють оцінити зміни досліджуваного показника у часі, з урахуванням впливу на нього супутніх факторів. Більш висока вартість, недостатня прихильність учасників і багато інші нюанси визначають меншу кількість наукових робіт з даної проблеми. (Таблиця 3)

Таблиця 3. Лонгитудинальные дослідження за участю людей

У дослідження Allen et al були включені 32 дорослих волонтера, які не займаються спортом, з індексом маси тіла (ІМТ) <25 або >30, яким протягом 6 тижнів була призначена певна програма вправ (30-60 хв, 3 рази в тиждень) з суворим контролем раціону. У результаті вчені виявили значні зміни мікробного співтовариства кишечнику незалежно від ІМТ. Зокрема, відзначалося підвищення частки Faecalibacterium у осіб з ІМТ< 25, але зниження їх частки серед учасників з ІМТ >30. Чисельність Bacteroides, навпаки, виявилася нижчою, ніж у осіб з ІМТ< 25 після вправ, в той час як серед учасників з ІМТ >30 виявлено збільшення числа даних мікроорганізмів. У завершенні дослідження також відзначалося підвищення чисельності бутират-продукуючих таксонів, однак лише у суб’єктів з ІМТ< 25.(36)

Наступним етапом експерименту стало вивчення складу та метаболічної активності кишкового мікробіома учасників дослідження через 6 тижнів після закінчення фізичних вправ. У цей період усі учасники повинні були утриматися від надмірної фізичної активності, їх раціон також враховувався. В результаті зазначалося «повернення» складу мікробіоти кишечника до вихідного, відзначається до початку вправ. Дослідники прийшли до висновку, що фізичні навантаження мають транзиторний і оборотний ефект щодо змін кишкової мікробіоти.(36)

Схожі дані були отримані групою вчених. Cronin et al. вивчили вплив короткочасних вправ і біологічно активних добавок (БАД), що містять сироватковий білок, на склад і функції кишкового мікробіома у людей з надмірною масою тіла та ожирінням (n=90). Фізичні вправи представляли собою аеробне навантаження тривалістю до 30 хв 3 рази на тиждень протягом 8 тижнів. У завершенні дослідження не було виявлено значущих змін у таксономічний склад або метаболізмі серед учасників, які мали фізичне навантаження без прийому БАД, в порівнянні з початком експерименту. У осіб, що приймали БАД і виконували вправи малася тенденція до збільшення різноманітності мікробного співтовариства, що зберігалася в порівнянні з групою, що одержувала БАД і не займалася фізичними вправами. Метагеномний аналіз виявив незначні зміни в метаболізмі мікробіома у всіх групах. (37)

Munukka et al. також звернулися до проблеми зміни метаболізму кишкового мікробіома при фізичному навантаженні. Учасниками дослідження стали жінки з надмірною вагою, мають сидячий спосіб життя (n = 17). У завершенні 6 тижнів занять на велотренажері в їх складі мікрофлори зазначалося відносне збільшення чисельності A. muciniphila і зниження Proteobacteria. Метагеномний аналіз виявив зниження експресії генів, пов’язаних з метаболізмом фруктози і амінокислот. (38)

Таким чином, отримані дані свідчать, що фізичні навантаження мають незалежне вплив на мікробіом кишечника. Тим не менш, для більш значущих таксономічних і метагеномных змін, ймовірно, потрібне збільшення тривалості і інтенсивності аеробних навантажень. Мікробіота худих людей, ймовірно, краще піддається змінам за допомогою вправ, ніж у осіб з надмірною масою тіла та ожирінням.

Потенційні механізми змін кишкового мікробіома при фізичних вправах

В даний час учені не прийшли до єдиної концепції щодо того, які механізми лежать в основі впливу фізичних вправ на мікробіом кишечника. Висловлюються різні припущення про потенційний вплив багатьох факторів (Рисунок 1).

Малюнок 1. Модель впливу фізичних вправ на мікробіом кишечника з потенційним впливом на здоров’я людини.

Однією з гіпотез служить вплив на мікробіом допомогою змін у лімфоїдній тканині кишечнику. Імунні клітини знаходяться в безпосередній близькості від мікробного співтовариства і виробляє захисні фактори. Hoffman-Goetz et al в експериментах на тваринах продемонстрували зміну експресії генів інтраепітеліальних лімфоцитів, зниження регуляторної активності прозапальних цитокінів, підвищення продукції протизапальних цитокінів і антиоксидантів. (39)

Поряд з цим, вправи можуть сприяти підтримці цілісності слизового бар’єру кишечнику. Слиз відіграє важливу роль у захисті епітеліоцитів від мікробної адгезії і служить необхідним субстратом для певних бактерій, наприклад, A. muciniphila.(40)

Фізичні вправи збільшують температуру тіла і дають певне навантаження на серцево-судинну систему, що приводить до зниження интестинального кровотоку більш ніж на 50%, з розвитком значної ішемії через 10 хвилин в середньому, при вправах високої інтенсивності. Під час відпочинку кровотік в органах швидко відновлюється. Епітеліальні клітини кишечника в якості джерела енергії використовують кисень, таким чином інтенсивне фізичне навантаження призводить до транзиторному порушення їх метаболізму і короткочасного зниження функції білків щільних контактів, а отже цілісності епітеліального бар’єру. (41), Імовірно, через імунні клітини, що знаходяться в безпосередній близькості від кишкового бар’єру, в короткий період ішемії можуть безпосередньо взаємодіяти з мікробіотою, з подальшим зміною її таксономічного складу. (42) Незважаючи на те, що підвищення кишкової проникності відзначається транзиторні при раптової сильної фізичної навантаженні, цей ефект може бути знівельовано при регулярної фізичної активності. Вчені оцінюють фізичні вправи як позитивний стресовий фактор для кишечника, стимулює адаптацію і поліпшує міцність кишкового бар’єру в тривалій перспективі. (43)

Не менш важливим механізмом, за допомогою якого вправи впливають на кишковий мікробіом, служить зміна моторики і ентеральної нервової системи кишечника. Активність поперечнополосатой мускулатури сприяє активації гладких м’язових волокон у стінці ШЛУНКОВО-кишкового тракту, завдяки чому скорочується час транзиту вмісту товстої кишці. (44) В той же час активація автономної нервової системи збільшує одночасно симпатичний тонус і вплив вагуса. Фізичні вправи значно прискорюють метаболічний потік, що стимулює вивільнення миокинов, нейроендокринних гормонів, які взаємодіють з кишечником і його мікрофлорою безпосередньо або через імунні шляху (45). (Малюнок 2)

Малюнок 2. Блок-схема функцій мікробіома кишечника і його взаємодії з іншими органами і системами в нормі і при патології.

Виділення великої кількості лактату при фізичному навантаженні може змінювати рН всередині кишечника через секреції цієї речовини в його просвіт.

Прискорення рухової активності кишкової трубки опосередковано впливає на зміну рН, секрецію слизу, формування біоплівок мікрофлорою і доступність поживних речовин для бактерій. Відзначається також підвищення продукції мозкового нейротрофічних фактора, який позитивно впливає на настрій і знижує ймовірність розвитку депресивних і тривожних розладів. (46)

Крім того, фізичні вправи можуть сприяти зміні ентерогепатичній циркуляції жовчних кислот. Meissner et al. було встановлено, що у мишей з гіперхолестеринемією після бігу всередині колеса протягом 12 тижнів відзначається підвищення секреції жовчних кислот і їх виділення з фекаліями. Жовчні кислоти виділені в якості одного з факторів, що визначають структуру кишкового мікробіома, і зміна їх екскреції може істотно відбитися на таксономічний склад мікробіома кишечника. (47)

Ще одним механізмом, недостатньо вивченим на сьогодні, служить так званий метаболічний потік, під яким розуміють швидкість обороту молекул через метаболічні шляхи. (48)

Таким чином, існує безліч різних механізмів, потенційно відповідальних за зміну кишкового мікробіома на тлі фізичних вправ. Необхідні подальші дослідження для уточнення наведених гіпотез.

Майбутні перспективи

В цілому, все більше даних свідчить про те, що регулярні заняття фізичними вправами сприятливо впливають на таксономічний склад і метаболізм кишкової мікробіоти. (49) Це може частково пояснювати спостерігається позитивний ефект регулярної фізичної активності на здоров’я людини. Незважаючи на велику кількість експериментів в області змін мікробіома кишечника при фізичному навантаженні, залишається багато запитань, відповісти на які покликані майбутні дослідження. Зокрема, необхідно з’ясувати, яка частота, режим і інтенсивність вправи краще для профілактики захворювань та їх ускладнень, як фізичні навантаження впливають на кишковий мікробіом дітей та літніх людей. Взаємодія вправ з раціоном харчування, можливість додавання пробіотиків і пребіотиків при цьому залишається невивченим питанням.

Важливим недоліком досліджень, який необхідно усунути в майбутньому, є відсутність оцінки впливу вправ на представників, які не належать до бактерій (археи, гриби, віруси).

Тим не менше, з урахуванням зростаючої доступності метагеномных методів дослідження мікробіома, вирішення зазначених питань представляється можливим. У перспективі отримані дані здатні сформувати новий, заснований на індивідуальному підході до зміни мікробіома кишечника, з урахуванням фізичних вправ і дієти.

Список літератури:

1. Codella R, Terruzzi I, Luzi L. Sugars, exercise and health. J. Affective Disord2017;224:76-86.
2. Brestoff JR, Artis D. Commensal bacteria at the interface of host metabolism and the immune system. Nat. Immunol. 2013; 14(7):676-84.
3. Morgan XC, Huttenhower C. Meta’omic analytic techniques for studying the intestinal microbiome. Gastroenterology. 2014; 146(6):1437-1448.e1.
4. Scott KP, Jean-Michel A, Midtvedt T, van Hemert S. Manipulating the gut microbiota to maintain health and treat disease. Microb. Ecol. Health
Dis. 2015; 26(1):25877.
5. HumanMicrobiome Project Consortium. Structure, function and diversity of the healthy human microbiome. Nature. 2012; 486(7402):207-14.
6. Perez-Muñoz ME, Arrieta M-C, Ramer-Tait AE, Walter J. A critical assessment of the «sterile womb» and «in utero colonization hypotheses: implications for research on the pioneer infant microbiome. Microbiome. 2017; 5(1):48.
7. Penders J, Thijs C, Vink C, et al. Factors influencing the composition of the intestinal microbiota in early infancy. Pediatrics. 2006; 118(2):511-21.
8. Marchesi JR, Adams DH, Fava F, et al. The gut microbiota health and host: a new clinical frontier. Gut. 2015; 65(2):330-9.
9. Maier L, Pruteanu M, Kuhn M, et al. Extensive impact of non-antibiotic drugs on human gut bacteria. Nature. 2018; 555(7698):623-8.
10. David LA,Maurice CF, Carmody RN, et al. Diet rapidly and reproducibly alters the human gut microbiome. Nature. 2014; 505(7484):559-63.
11. Evans JM, Morris LS, Marchesi JR. The gut microbiome: the role of a virtual in the organ of endocrinology the host. J Endocrinol 2013;218:R37–47
12. WHO Information sheet: global recommendations on physical activity forhealth 5-17 years old. WHO; 2015.
13. Clarke SF, Murphy EF, O SullivanO, et al. Exercise and associated dietary extremes impact on gut microbial diversity. Gut. 2014; 63(12):1913-20.
14. Hsu YJ, Chiu CC, Li YP, Huang WC, Huang Y Te, Huang CC, et al. Effect ofintestinal microbiota on exercise performance in mice. J Strength Cond Res2015;29:552-8
15. Matsumoto M, Inoue R, Tsukahara T, Ushida K, Chiji H, Matsubara N, et al.Voluntary running exercise alters microbiota composition and increasesn-butyrate concentration in the rat cecum. Biosci Biotechnol Biochem2008;72:572-6
16. Campbell SC, Wisniewski PJ, Noji M, McGuinness LR, Häggblom MM,Lightfoot SA, et al. The effect of diet and exercise on intestinalintegrity and microbial diversity in mice. PLoS One 2016;11:e0150502
17. Evans CC, LePard KJ, Kwak JW, Stancukas MC, Laskowski S, Dougherty J,et al. Exercise prevents weight gain and alters the gut microbiota in amouse model of high fat diet-induced obesity. PLoS One 2014;9:e92193
18. Cook MD, Allen JM, Pence BD, Wallig MA, Gaskins HR, White BA, et al. Exercise and gut immune function: evidence of alterations in colon immune cellhomeostasis and microbiome characteristics with exercise training. ImmunolCell Товарbiol 2016;94:158-63
19. Dietand exercise orthogonally alter the gut microbiome and reveal independent associations with anxiety and cognition. Mol Neurodegener 2014;9:36,http://dx.doi.org/10.1186/1750-1326-9-36.
20. Denou E, Marcinko K, Surette MG, Steinberg GR, Schertzer JD. High-intensityexercise training increases the diversity and metabolic capacity of the mousedistal gut microbiota during diet-induced obesity. Am J Physiol EndocrinolMetab 2016;310:E982–93
21. Liu T-W, Park Y-M, Holscher HD, Padilla J, Scroggins RJ, Welly R, et al.Physical activity differentially affects the cecal microbiota of ovariectomizedfemale rats selectively bred for high and low aerobic capacity. PLoS One2015;10:e0136150
22. Allen JM, Berg Miller ME, Pence BD, Whitlock K, Nehra V, Gask-ins HR, et al. Voluntary and forced exercise differentially alters thegut microbiome in C57BL/6J mice. J Appl Physiol 2015;118:1059-66
23. Lambert JE, Myslicki JP, Bomhof MR, Belke DD, Shearer J, Reimer RA. Exercisetraining modifies gut microbiota in normal and diabetic mice. Appl PhysiolNutr Metab 2015;40:749-52
24. Lamoureux EV, Grandy SA, Langille MGI. Moderate exercise has limited but distinguishable effects on the mouse microbiome. mSystems2017;2:e00006–17
25. Petriz BA, Castro AP, Almeida JA, Gomes CP, Fernandes GR, KrugerRH, et al. Exercise induction of gut microbiota modifications inobese, non-obese and hypertensive rats. BMC Genomics 2014;15:511
26. Mika A, Van Treuren W, González A, Herrera JJ, Knight R, Fleshner M. Exercise is more effective at altering gut microbial composition and producingstable changes in lean mass in juvenile versus adult male F344 rats. PLoS One2015; 10:e0125889
27. Mailing LJ, Allen JM, Buford TW, Fields CJ, Woods JA.Exercise and the Gut Microbiome: A Review of the Evidence, Potential Mechanisms, and Implications for Human Health.xerc Sport Sci Rev. 2019 Apr;47(2):75-85.
28. Clarke SF, Murphy EF, O SullivanO, et al. Exercise and associated dietary extremes impact on gut microbial diversity. Gut. 2014; 63(12):1913-20.
29. EstakiM, Pither J, Baumeister P, et al. Cardiorespiratory fitness as a predictor of intestinal microbial diversity and distinct metagenomic functions. Microbiome. 2016; 4:42.
30. Stewart CJ, Nelson A, Campbell MD, et al. Gut microbiota of Type 1 diabetes patients with good glycaemic control and high physical fitness is similar to people without diabetes: an observational study. Diabet. Med. 2017; 34:127-34.
31. Bressa C, Bailén-AndrinoM, Pérez-Santiago J, et al. Differences in gutmicrobiota profile between women with active lifestyle and осідлий women. PLoS One. 2017; 12(2):e0171352.
32. Yang Y, Shi Y,Wiklund P, et al. The association between cardiorespiratory fitness and gut microbiota composition in premenopausal women. Nutrients. 2017; 9(8):792.
33. Barton W, Penney NC, Cronin O, et al. The microbiome of professional athletes differs from that of more осідлий subjects in composition and particularly at the functional metabolic level. Gut. 2018; 67(4):625-33.
34. Durk RP, Castillo E, Márquez-Magaña L, et al. Gut microbiota composition is related to cardiorespiratory fitness in healthy young adults. Int. J. Sport Nutr. Exerc. Metab. 2018; 1-15.
35. Paulsen JA, Ptacek TS, Carter SJ, et al. Gut microbiota composition associated with alterations in cardiorespiratory fitness and psychosocial outcomes among breast cancer survivors. Support Cancer Care. 2017; 25(5):1563-70.
36. Allen JM, Mailing LJ, Niemiro GM, et al. Exercise alters gut microbiota composition and function in lean and obese humans. Med. Sci. Sports Exerc. 2018; 50(4):747-57.
37. Cronin O, Barton W, Skuse P, et al. A prospective metagenomic and metabolomic analysis of the impact of exercise and/or whey protein supplementation on the gut microbiome of осідлий adults. mSystems. 2018; 3(3):e00044–18.

38. Munukka E, Ahtiainen JP, Puigbó P, et al. Six-week endurance exercise alters gut metagenome that is not reflected in systemic metabolism in

39. PackerN,Hoffman-Goetz L. Exercise training reduces inflammatory mediators in the intestinal tract of healthy older adult mice. Can. J. Aging. 2012; 31(2):161-71.

40. Hoffman-Goetz L, Pervaiz N, Guan J. Voluntary exercise training in mice increases the expression of antioxidant enzymes and decreases the expression of TNF-alpha in intestinal lymphocytes. Brain Behav. Immun. 2009; 23(4):498-506.
41. vanWijck K, Lenaerts K, van Loon LJ, PetersWH, BuurmanWA,Dejong CH. Exercise-induced splanchnic hypoperfusion results in gut dysfunction in healthy men. PLoS One. 2011; 6(7):e22366.
42. Otte JA, Oostveen E,Geelkerken RH, GroeneveldAB, Kolkman JJ. Exercise induces gastric ischemia in healthy volunteers: a tonometry study. J. Appl. Physiol. 2001; 91(2):866-71.
43. Lira FS, Rosa JC, Pimentel GD, et al. Endotoxin levels correlate positively with a осідлий lifestyle and negatively with highly trained subjects. Lipids Health Dis. 2010; 9:82.
44. Dainese R, Serra J, Azpiroz F, Malagelada J-R. Effects of physical activity on intestinal gas transit and evacuation in healthy subjects. Am. J. Med. 2004; 116(8):536-9.
45. Freeman JV, Dewey FE, Hadley DM, Myers J, Froelicher VF. Autonomic nervous system interaction with the cardiovascular system during exercise. Prog. Cardiovasc. Dis. 2006; 48(5):342-62.
46. Song BK, Cho KO, Jo Y, Oh JW, Kim YS. Colon transit time according to physical activity level in adults. J. Neurogastroenterol. Motil. 2012; 18(1):64-9.
47. Meissner M, Lombardo E, Havinga R, Tietge UJ, Kuipers F, Groen AK. Voluntary wheel running increases bile acid as well as cholesterol excretion atherosclerosis and decreases in hypercholesterolemic mice. Atherosclerosis. 2011; 218(2):323-9.
48. Egan B, Zierath JR. Exercise metabolism and the regulation of molecular skeletal muscle adaptation. Cell Metab. 2013; 17(2):162-84.

49. Warburton DE,Nicol CW, Bredin SS.Health benefits of physical activity:the evidence. CMAJ. 2006; 174(6):801-9.